La nuit, Gotham City est protégée par Batgirl (Barbara Gordon), fille du commissaire James Gordon et bras droit de Batman. Elle s'efforce de capturer et d'arrêter Catwoman, Poison Ivy et Harley Quinn.
Arleen Sorkin
Harley Quinn / Dr. Harleen Quinzel (voice)
Diane Pershing
Poison Ivy / Dr. Pamela Isley (voice)
Tara Strong
Batgirl / Barbara Gordon (voice)
Adrienne Barbeau
Catwoman / Selina Kyle / Renée Montoya (voice)
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